Как да извлечем ДНК от банан

Artículo revisado y aprobado por nuestro equipo editorial, siguiendo los criterios de redacción y edición de YuBrain.

Това е един от най-популярните процеси за извличане на растителен генетичен материал и възможност за наблюдението му под микроскоп. Може да се направи и с домати, маракуя или други плодове. В този случай е използван банан поради лесния начин на обработка и няколкото стъпки, необходими за смачкването му в нашия експеримент.

За да извлечете ДНК от живовляк или банан, трябва:

  • Живовляк или банан.
  • Много остър нож.
  • Вилица или преса за картофи.
  • Течен перилен препарат или сапун за пране.
  • Минерална вода.
  • Малко сол.
  • Сода бикарбонат.
  • Фуния.
  • Кухненска хартия или хартиени филтри.
  • Много студен алкохол.
  • Контейнери от всякакви материали за извършване на стъпките. Една ще е необходима за пюрирания банан, а друга за сапуна и натрия. Полезно е, ако направите крайната смес в прозрачен съд, където можете лесно да видите съдържанието отвън.
  • Стъклена или пластмасова сламка, за предпочитане прозрачна. Като алтернатива също е добра идея да имате под ръка игла за плетене с връх на кука.

Не забравяйте да избягвате да използвате прибори, които могат да бъдат замърсени, за да смачкате плодовете. Рендето за сирене, например, може да има следи от мазнина, когато се използва, а ние не искаме те да замърсят крайната проба.

стъпки

  • Първата стъпка ще се състои в нарязване на банана на малки парчета. След това е удобно да смачкате банана, така че да стане пюре. Правейки това, ще разбиете клетките на този плод, които съдържат ДНК.
  • Като се има предвид, че клетките обикновено са покрити с липидна мембрана, ще се нуждаем от допълнителен метод, за да ги разрушим по-задълбочено. За целта в следващата стъпка ще направим разтвор в отделен контейнер. Този разтвор често се нарича лизисен буфер в академичните кръгове по химия.

За да направим лизиращия буфер, трябва да вземем течен или сапун за пране и чаша минерална вода и да ги разредим. Ако е течността, две струи от нея ще са достатъчни, за да оцветят водата. Ако е перилен препарат на прах, една супена лъжица ще бъде достатъчна.

Детергентът ще изпълнява функцията на влачене на липиди (които са вид мазнини) и протеини (вид основен макронутриент), които са разтворими в липиди. Трябва също да добавим към тази смес две чаени лъжички сол и шест чаени лъжички сода за хляб. Натрият в тези две съединения, със своите положителни йони, улеснява целостта на нишките, които изграждат ДНК. По-специално бикарбонатът ще отговаря за неутрализирането на pH на разтвора, за да се предотврати увреждането на ДНК. Сега нишките на ДНК са незащитени, защото са лишени от липидите, които са ги покривали.

  • Сега ще прибегнем до метод на физическо разделяне. Това, което трябва да направим, е да добавим към нашия детергентен разтвор биологичния материал, който сме извлекли в стъпка 1. Взимаме четири супени лъжици и ги разбъркваме най-малко три минути, максимум пет минути.

С кухненската хартия или филтрите за кафе като елементарен филтър и с помощта на фуния, поставяме един от тези филтри във фунията и изсипваме течността от нашата смес в контейнера. Именно от тази смес най-накрая ще извлечем ДНК пробата, която ще бъде наблюдавана. 

В този момент ще имаме нашия разтвор във водна фаза и можем лесно да съберем нашия генетичен материал. Разтворът съдържа РНК, ДНК и някои протеини, които са разтворими във вода.

химическо разделяне

Сега ще обясним метода на химичното разделяне, като се възползваме от химичните характеристики на молекулите на биологичния материал, който ще разделяме. Ще използваме 5 ml от разтвора, който току-що сме филтрирали. Смесваме с утроено количество студен алкохол, в случая 15 мл. Студената температура на алкохола ще гарантира по-добро изпълнение на метода. Тъй като частта от биологичния разтвор, която съдържа ДНК, не е разтворима в алкохол, ще видим как тя се агломерира и отделя от другите елементи, образувайки слой, който лесно се разпознава с невъоръжено око.

Важно е да се има предвид, че алкохолът трябва да се добавя бавно, за предпочитане чрез плъзгане по краищата на съда, където чака водният разтвор. Също така се опитваме да не повредим ДНК, което може да искаме да погледнем под микроскоп по-късно.

Сега, когато можем да различим мътния разтвор, който носи ДНК на нашата проба, ще продължим да го извличаме от водната среда. Взимаме сламката и я въвеждаме във водната среда, докато докосне предварително приготвения разтвор. Веднага след това покриваме външния край на сламката с пръст, за да покрием изтичането на въздух и да служи за задържане на разтвора. Ако не успеем да накараме разтвора да се придържа към върха на сламката, ние го извличаме, без изобщо да махаме пръста си от другия край, и продължаваме да повтаряме процеса, като се уверяваме, че сламката поне видимо е навлязла в плътната среда, съдържаща материалът генетичен. Поставяме пръста си в противоположния край, като го покриваме добре и се опитваме малко по малко да извлечем тази среда от водния разтвор, като бавно движим сламката навън.

Вероятно ще ни е трудно да хванем това последно решение, така че ако не успеем с предишния метод, можем да използваме иглата за плетене с върха на куката надолу, за да извлечем тази гъста част от разтвора от водната среда.

Сега имаме нашия разтвор на растителна ДНК, готов за разглеждане под микроскоп. Препоръчва се незабавно да се постави в петриево блюдо или подобен съд, за да се избегне замърсяване.

Препратки

Образовайте и създавайте. (s/f). Как да извлечем ДНК от растение? Наличен на: https://www.educaycrea.com/2015/09/como-extraer-el-adn-de-un-vegetal/

Очоа, Дж. (2010). Екстракция на ДНК с кухненски материал. Налично: https://www.youtube.com/watch?v=PkjtFM_UVxk&t=243s

Isabel Matos (M.A.)
Isabel Matos (M.A.)
(Master en en Inglés como lengua extranjera.) - COLABORADORA. Redactora y divulgadora.

Artículos relacionados